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Apr 03, 2024

Diagnostic de la tuberculose génito-urinaire : détection du lipoarabinomannane mycobactérien et du MPT

Scientific Reports volume 13, Numéro d'article : 11560 (2023) Citer cet article 405 Accès 1 Détails Altmetric Metrics Nous avons détecté un cocktail de Mycobacterium tuberculosis lipoarabinomannan (LAM) et

Rapports scientifiques volume 13, Numéro d'article : 11560 (2023) Citer cet article

405 Accès

1 Altmétrique

Détails des métriques

Nous avons détecté un cocktail de biomarqueurs Mycobacterium tuberculosis lipoarabinomannan (LAM) et MPT-64 dans les vésicules extracellulaires (VE) urinaires de patients atteints de tuberculose génito-urinaire (GUTB) par un test immuno-PCR nano-basé (I-PCR), c'est-à-dire couplé à des billes magnétiques. I-PCR à base de nanoparticules d'or (MB-AuNP-I-PCR) et comparé les résultats avec l'I-PCR et la magnéto-ELISA. La taille des EV urinaires variait entre 52,6 et 220,4 nm, comme analysé par microscopie électronique à transmission (TEM) et analyse de suivi des nanoparticules. Les AuNP fonctionnalisés (couplés à des anticorps/oligonucléotides de détection) ont été caractérisés par spectroscopie UV-vis, TEM, ELISA, PCR, microscopie à force atomique et spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier, tandis que la conjugaison des anticorps de capture avec les MB a été validée par spectroscopie UV-vis et magnéto- ELISA. Notre MB-AuNP-I-PCR a montré des sensibilités de 85 % et 87,2 % dans les cas cliniquement suspectés (n = 40) et totaux (n = 47) de GUTB, respectivement, avec une spécificité de 97,1 % chez les témoins non tuberculeux (n = 35). . Ces résultats ont ensuite été authentifiés par l'I-PCR quantitative en temps réel SYBR Green MB-AuNP (MB-AuNP-RT-I-PCR). Parallèlement, l'I-PCR et la magnéto-ELISA ont montré des sensibilités de 68,1 % et 61,7 %, respectivement, dans le total des cas de GUTB, qui étaient significativement inférieures (p < 0,05 à 0,01) par rapport à la MB-AuNP-I-PCR. De manière significative, une large gamme (400 fg/mL – 11 ng/mL) de LAM+MPT-64 a été quantifiée dans les EV urinaires des cas de GUTB par SYBR Green MB-AuNP-RT-I-PCR, qui peut évaluer la dynamique de la maladie. Cette étude améliorera certainement les algorithmes actuels utilisés dans les diagnostics GUTB.

Avant la pandémie de COVID-19, la tuberculose (TB) était la principale cause de décès dus à un seul agent infectieux, dépassant le VIH/SIDA. Aujourd'hui, la tuberculose est la deuxième cause infectieuse de décès après le COVID-191. En 2021, environ 1,4 million et 0,19 million de décès ont été signalés respectivement parmi les personnes infectées par la tuberculose séronégatives et séropositives1. La pandémie de COVID-19 a eu un impact négatif sur l’accès au diagnostic et au traitement de la tuberculose et sur la charge globale de la tuberculose1. En 2021, l'Inde représentait le fardeau de tuberculose le plus élevé (28 %), suivi de l'Indonésie (9,2 %) et de la Chine (7,4 %)1. La tuberculose génito-urinaire (GUTB) est la deuxième forme de tuberculose extrapulmonaire (EPTB) la plus signalée dans les pays en développement. comme l'Inde et la troisième forme répandue dans les pays à faible endémie2. Les présentations cliniques inhabituelles, la localisation de la maladie sur des sites anatomiques variés et la nature paucibacillaire des échantillons font du diagnostic de GUTB homme/femme un défi complexe. Pour réduire la morbidité/mortalité associée à la GUTB, un diagnostic rapide et précis est immédiatement nécessaire. Dans les pays en développement, l’examen microscopique des frottis est largement utilisé mais manque de sensibilité et de reproductibilité3. Bien que l'identification par culture de Mycobacterium tuberculosis (Mtb) à partir de biopsies de l'endomètre (EB)/d'échantillons d'urine de cas de GUTB soit considérée comme l'étalon-or/de référence, elle présente généralement une faible sensibilité sur le milieu de Lowenstein-Jensen (LJ) en raison de la faible charge bactérienne à l'intérieur. eux4,5. Parallèlement, le délai d'exécution est long, de 4 à 6 semaines, et nécessite l'expertise de techniciens compétents5. L'examen histopathologique (HPE) est une technique importante pour diagnostiquer la GUTB5, même si l'HPE n'est pas pathognomonique, à l'exception de la présence de bactéries acido-résistantes (AFB), car elle ne peut pas faire la différence entre la GUTB et d'autres maladies granulomateuses6,7. Il est important de noter que l'échographie, la tomodensitométrie et l'urographie intraveineuse sont les principales modalités d'imagerie utilisées pour le diagnostic de GUTB chez l'homme et chez la femme, tandis que la laparoscopie et l'hystérosalpingographie sont principalement utilisées pour diagnostiquer la GUTB chez la femme4,8, mais aucune technique d'imagerie à elle seule n'est adéquate pour un diagnostic définitif.

Il convient de noter qu'il est fastidieux de collecter des échantillons de GUTB, par exemple des biopsies de la prostate/rénales et des EB, car ils impliquent une procédure invasive rigoureuse, il serait intéressant d'explorer des échantillons facilement accessibles, tels que l'urine, le plasma/sérum, etc.4, 6. Le principal avantage de la collecte d’urine par rapport à d’autres biofluides est qu’elle est facilement disponible en grande quantité et obtenue de manière non invasive9. Cependant, la concentration de divers biomarqueurs et constituants biochimiques est assez variable dans l'urine et de nature dynamique en raison des différents apports hydriques, du moment du prélèvement de l'échantillon, de l'âge et de l'état de santé différent des individus9.